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這些異?,F(xiàn)象可能是流動相脫氣不足,你知道嗎?

更新時間:2022-08-10      點(diǎn)擊次數(shù):1524

液相色譜流動相使用前為什么要脫氣?脫氣有什么作用?如何脫氣?脫氣不足可能造成哪些異常現(xiàn)象?



(1)脫氣的必要性:


a.氣泡會增加基線的噪聲,造成靈敏度下降,甚至無法分析(噪聲增大,基線不穩(wěn),突然跳動)。

b.溶解的氧氣還會導(dǎo)致樣品中某些組份被氧化,溶解的氧氣與色譜柱中固定相(如烷基胺)發(fā)生反應(yīng),柱效降低從而改變柱的分離性能。

c.溶解氧能與某些溶劑(如甲醇、四氫呋喃)形成有紫外吸收的絡(luò)合物,絡(luò)合物會提高背景吸收(特別是在260nm以下),并導(dǎo)致檢測靈敏度的輕微降低,會在梯度淋洗時造成基線漂移或形成鬼峰(假峰)。

d.若用FLD(熒光檢測器),溶解氧在一定條件下還會引起淬滅現(xiàn)象,特別是對芳香烴、脂肪醛、酮等。在某些情況下,熒光響應(yīng)可降低達(dá)95%。

(2)脫氣的作用:



a.除去其中溶解的氣體(如O2),以防止在洗脫過程中當(dāng)流動相由色譜柱流至檢測器時,因壓力降低而產(chǎn)生氣泡。

b.排出氣泡能減少泵工作的傷害,提高檢測器的性能高,改善靈敏度。

(3)脫氣的方式:



a.加熱回流法:效果較好,但操作復(fù)雜,且有毒性揮發(fā)污染,同時需要考慮低沸點(diǎn)溶劑揮發(fā)造成的組成變化。

b.抽真空脫氣法:缺點(diǎn)是易抽走有機(jī)相。

c.超聲脫氣法:流動相放在超聲波容器中(一般500mL溶液需超聲20~30min),此法不影響溶劑組成。超聲時應(yīng)注意避免溶劑瓶與超聲槽底部或壁接觸,以免玻璃瓶破裂,容器內(nèi)液面不要高出水面太多。

d.氦氣脫氣法:在色譜操作前和進(jìn)行時,將惰性氣體噴入溶劑中。嚴(yán)格來說,此方法不能將溶劑脫氣,它只是用一種低溶解度的惰性氣體(通常是氦)將空氣替換出來。主要利用液體中氦氣的溶解度比空氣低,連續(xù)吹氦脫氣,效果較好,但成本高。

e.在線真空脫氣法:利用在線脫氣機(jī)在線脫氣,智能控制,無需額外操作,成本低,脫氣效果明顯優(yōu)于以上幾種方法,并適用于多元溶劑體系。

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