高效液相色譜法測定生物發(fā)酵產(chǎn)品中成分腺苷的含量

本方法適用于蟲草、菌粉、靈芝等產(chǎn)品系列發(fā)酵產(chǎn)品

1 儀器與試劑

1.1儀器

高效液相色譜儀( LC-500A) 配SPD-500紫外檢測器

N2000色譜工作站；

超聲波清洗器，十萬分之一天平；

1.2試劑                                          

腺苷對照品含量≥99.0

色譜純甲醇，水為超純水其他為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱 C18( 150 mm × 4.6 mm，5μm)

流動相：甲醇：磷酸鹽緩沖液（pH 6.5） = 10：1

流速為1.0 ml /min

檢測波長為260nm；柱溫為室溫；進樣量為10 μl。

2.2 供試品溶液的制備

取擬青霉約1.0g，精密稱定，置于50 ml 量瓶，加入20% 甲醇定容至50 ml，密塞，稱定重量，超聲20min，放至室溫后稱重，用甲醇補足減失的重量。用0. 45 μm 微孔濾膜濾過后供分析。

                                                                      腺苷標準品譜圖

               擬青霉樣品譜圖

                                                        頭孢菌樣品譜圖

3. 液相色譜儀器配置